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地址:上海市松江区曹农路5弄40号从 0 到 1 教你!冷冻研磨仪处理宫颈组织样品的正确知识
今天和大家分享一次超实用的宫颈组织样品前处理过程!在分子生物学实验中,样本前处理直接影响实验结果的准确性,这次用到的冷冻研磨仪简直是 “神助攻”!
材料准备清单:
冷冻研磨仪:实验的核心设备,低温环境能有效保护样品生物活性
冷冻研磨仪 JXFSTPRP-CLN
Trizol:核酸提取的关键试剂,能高效裂解细胞
宫颈组织:本次实验的主角,不同样本特性决定处理方法
研磨珠、研磨管:辅助研磨,帮助充分破碎组织
详细实验步骤:
仪器预冷:实验前将冷冻研磨仪预冷至 - 20℃,这一步非常重要!低温环境能最大限度保留样品中的生物活性物质,保证后续实验的可靠性。
样品预处理:由于宫颈组织中结缔组织含量较高,直接研磨效果不好。我先用手术剪将样品仔细剪碎,再放入 2ml 研磨管,加入适量研磨珠和核酸提取液 Trizol,采用湿磨的方式进行处理。
设置研磨参数:把研磨仪频率设为 60Hz,研磨时间 60 秒。这个参数是我多次实验总结出来的,能让组织研磨得既充分又不会过度破坏样本。
室温静置:研磨完成后,将样品在室温(15℃-30℃)下放置 5 分钟,让核酸蛋白复合物充分分离,为后续提取做准备。
加入氯仿萃取:每 1ml Trizol 对应加入 0.2ml 氯仿,剧烈振荡 15 秒后,室温静置 3 分钟。这一步能有效分层,便于后续分离。
低温离心:最后在 4℃环境下进行离心操作,分离出上清液和沉淀物,上清液中就含有我们需要的核酸啦!
实验效果:
宫颈组织研磨前后效果对比图
实验小贴士:
仪器配平:使用冷冻研磨仪和离心机时,一定要注意配平!否则不仅影响实验结果,还可能损坏仪器。
规范操作:整个实验过程最好在通风柜中进行,Trizol 和氯仿都具有一定挥发性,保护自己才能更好地做实验!
低温保护:尽量全程保持低温环境,防止样品失活,从预冷仪器到低温离心,每一步都不能马虎!
希望这次的分享能给做相关实验的小伙伴带来帮助~通过本次实验,清晰展现了冷冻研磨仪在宫颈组织样品前处理中的高效与可靠。从预冷准备到参数设置,每一个环节都至关重要。后续还将围绕不同样本特性及实验需求,继续探索冷冻研磨仪的更多应用可能,期待为大家带来更多实用的科研经验分享!
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